彩色預(yù)染蛋白 Marker plus(8-180kDa)包含了從 8kDa 到 180kDa 共 10 種高度純化并預(yù)染的重組蛋白質(zhì)(8, 16.5, 25, 31, 41, 52, 72, 95, 130,180kDa),其中 72kDa 條帶為橙紅色,8kDa 為綠色,其余條帶為藍(lán)色。本產(chǎn)品預(yù)染蛋白表觀 分子量經(jīng)過 thermo26610 和 26614 非預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)定,適合作為 SDS-PAGE 和 Western 的蛋白質(zhì)分 子量標(biāo)準(zhǔn),可用于監(jiān)測(cè)電泳過程中蛋白分離效果,檢驗(yàn) Western 轉(zhuǎn)膜(PVDF,尼龍膜或 NC 膜)效果,判斷蛋白 的分子量大小。 本彩色預(yù)染蛋白 Marker 已經(jīng)配制在 1x SDS-PAGE 上樣緩沖液中,可直接上樣使用,不需要煮沸、稀釋和加入還原劑處理。
20mMTris-H3PO4(pH7.5), 2mM EDTA, 1.5% (W/V) SDS,15 % (V/V) Glycerol, 3mM DTT,0.1% (V/V) Proclin300,4M Urea。
(1) 室溫下解凍后完全溶解并輕輕充分混勻后使用,不要煮沸; (2) 取本產(chǎn)品 5ul 與實(shí)驗(yàn)樣品同時(shí)進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳;建議有條件的實(shí)驗(yàn)室在初次使用本產(chǎn)品時(shí)可以根 據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)習(xí)慣通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定合適的上樣量,這樣可以節(jié)約成本,同時(shí)獲得效果更佳的實(shí)驗(yàn) 圖片; (3) 根據(jù)上樣孔的大小,本產(chǎn)品通常每次上樣 5-10ul(5x1.5mm 膠孔 5ul 足夠),即可在電泳時(shí)、電泳后和轉(zhuǎn)膜后 觀察到非常清楚的蛋白條帶; (4) 未使用的彩色預(yù)染蛋白 Marker 保存于儲(chǔ)存條件,在 4℃可放置 2 個(gè)月。
(1) 為避免反復(fù)凍融及污染,可將本產(chǎn)品分裝后,-20℃保存。 (2) 電泳時(shí)間不宜過長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間可能導(dǎo)致蛋白條帶出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。 (3) 在低濃度膠時(shí),低分子量蛋白會(huì)泳動(dòng)于染料前緣。 (4) 大分子量蛋白 Western blot 時(shí)需要延長(zhǎng)轉(zhuǎn)膜時(shí)間或加高轉(zhuǎn)膜電壓,如果效果不好建議減少轉(zhuǎn)膜液甲醇用 量,添加少量 SDS(終濃度不超過 0.05%)。 (5) 預(yù)染蛋白質(zhì)在不同的緩沖體系下有不同的表觀分子量,可在該緩沖體系中事先用非預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn) 校正,并按校正后的結(jié)果正常使用。 (6) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 (7) 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
更新中
1、可選擇孔徑0.22um的PVDF膜或者NC膜,轉(zhuǎn)膜時(shí)間縮短,另外可采用Tricine-SDS-PAGE體系;
2、也可以選擇PSQ 膜,同時(shí)縮短轉(zhuǎn)移時(shí)間。也可以將兩張膜疊在一起,再轉(zhuǎn)移。其他按步驟即可。
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