彩色預染蛋白 Marker(25- 400kDa)包含了從25kDa到400kDa共10種高度純化并預染的重組蛋白質(25,45,72,100,130, 160,200,250,300,400kDa) ，其中400kDa為紅色，72kDa條帶為橙紅色，25kDa為綠色，其余條帶為藍色。本產品預染蛋白表觀分子量經過Bio-Rad 1610363、 thermo26610和 26614非預染蛋白質分子量標準標定，適合作為SDS-PAGE和Western的蛋白質分子量標準，可用于監測電泳過程中蛋白分離效果，檢驗Western轉膜(PVDF 、尼龍膜或 NC膜)效果，判斷蛋白的分子量大小。
本彩色預染蛋白 Marker已經配制在1x SDS-PAGE上樣緩沖液中，可直接上樣使用，不需要煮沸、稀釋和加入還原劑處理。根據上樣孔大小，本彩色預染蛋白質分子量標準通常每次上樣10ul(5×1.5mm膠孔10ul足夠)，即可在電泳時、電泳后和轉膜后觀察到非常清楚的蛋白條帶。
62.5mM Tris-H3PO4(pH7.5) ，2mM EDTA ，2% (W/V)SDS ，33% (W/V)Glycerol ，5mM DTT， 0.02% (V/V) proclin300。
(1) 室溫下解凍后完全溶解并輕輕充分混勻后使用，不要煮沸；
(2) 取本產品10ul與實驗樣品同時進行聚丙烯酰胺凝膠電泳；建議有條件的實驗室在初次使用本產品時可以根據自身的實驗條件和實驗習慣通過預實驗確定合適的上樣量，這樣可以節約成本，同時獲得效果更佳的實驗圖片；
(3) 未使用的彩色預染蛋白Marker保存于儲存條件，在 4℃可放置 2 個月。
(1) 為避免反復凍融及污染，可將本產品分裝后，-20℃保存。
(2) 電泳時間不宜過長，長時間可能導致蛋白條帶出現彌散現象。
(3) 在低濃度膠時，低分子量蛋白會泳動于染料前緣。
(4) 大分子量蛋白 Western blot時需要延長轉膜時間或加高轉膜電壓，另外建議轉膜液不添加SDS，若實驗必須使用，建議SDS濃度不要超過 0.02-0.04%。
(5) 預染蛋白質在不同的緩沖體系下有不同的表觀分子量，可在該緩沖體系中事先用非預染蛋白質分子量標準校正，并按校正后的結果正常使用。
(6) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
(7) 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
答：可能的原因有：
1、膠濃度不對，不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差，可以調整濃度；
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度，延長孵育時間；
3、酶失活，建議直接將酶和底物進行混合，如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物；
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體，建議查詢相關文獻確定；
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建議設置陽性對照比對結果，增加標本上樣量。
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