Tris-甘氨酸電泳緩沖液(10x)用于Tris-HCl緩沖系統(tǒng)的SDS-PAGE時的電泳緩沖液,適用于Tris-HCl緩沖系統(tǒng)的聚丙烯酰胺凝膠,不適合用于Hepes等緩沖體系的聚丙烯酰胺凝膠。本產(chǎn)品為10倍濃縮溶液,加入超純水或去離子水稀釋為Tris-甘氨酸電泳緩沖液(1X)即可使用。
本電泳緩沖液含有SDS,適用于變性膠蛋白電泳,不適用于非變性蛋白電泳。本電泳緩沖液可以回收作為外槽電泳液,回收后可以再使用1-2次
量取100ml Tris-甘氨酸電泳緩沖液(10x),倒入到一潔凈的量筒中,加入超純水或去離子水混勻并定容到1升后即為Tris-甘氨酸電泳緩沖液(1x);也可根據(jù)需要自行量取一定量的Tris-甘氨酸電泳緩沖液(10x)進(jìn)行配制。具體使用方式按照相應(yīng)實驗需要直接使用即可?;厥蘸蟮碾娪疽嚎墒覝乇4?,通常室溫可保存2-3天。
配制好的電泳液使用時間不宜超過兩周。
低溫放置或者氣溫較低時運輸很可能會出現(xiàn)沉淀,通常室溫磁力攪拌約10-30分鐘可以讓沉淀完全溶解。
回收的電泳液可以作為外槽電泳液重復(fù)使用1-2次,但為了取得佳的電泳效果,應(yīng)使用沒有用過的電泳液。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現(xiàn)多條帶,建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強(qiáng),建議使用特異性強(qiáng)的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng),建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強(qiáng)度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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