Tris-HCl平衡鹽緩沖液,簡稱TBS,是常用于生物學研究的一種緩沖溶液,有很強的緩沖能力,有助于保持恒定的pH值,對很多酶反應是惰性的。TBS緩沖液主要應用于免疫組化、原位雜交、ELISA等實驗,清洗免疫印跡實驗中非特異性結合的抗體等。本產品主要組分為10mM Tris,150mM NaCl,pH 7.0-7.4(25℃)。使用時將每袋干粉徹底溶解于2000ml雙蒸水后即可使用。
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關文獻確定;
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設置陽性對照比對結果,增加標本上樣量。
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