對木質化較高的根、莖等植物組織進行石蠟切片時,組織較硬脆,需要對組織進行相應的軟化后,方能得到組織薄片。傳統軟化劑多以氫氟酸或甘油的水溶液為軟化劑,甘油溶液軟化時間較長,一般需3周以上。氫氟酸腐蝕性強、毒性大,二者對組織的軟化程度和切片效果多無法準確掌控,不利于廣泛應用。本軟化液針對現有技術的不足,提供一種新植物組織軟化劑及使用方法,本軟化劑揮發性小,無刺激性氣味,毒性小,軟化時間短,軟化時間較甘油軟化液縮短兩周,軟化時間可根據組織大小精確把握,軟化后的組織適于石蠟切片。
1.將植物組織離體后經過FAA固定液固定48h以上后,將固定液移除。
2.加入軟化劑進行軟化,軟化劑的加入量和軟化時間控制如下:
①軟化劑的加入量以將組織完全浸泡為準。
②軟化時間以4mm直徑葡萄根為基準軟化7天,組織直徑每增加1mm,軟化時間增加1天。
3.軟化后的組織在進行石蠟切片。
1.為了您的安全和健康,請采取必要的防范措施。操作時應戴一次性手套,穿實驗服,避免與皮膚接觸。
2.本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關文獻確定;
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設置陽性對照比對結果,增加標本上樣量。
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