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甲苯胺藍（Toloniumchloride），是一種化合物，分子式為C28H20N2O10S2·2Na，分子量為656.62，甲苯胺藍深綠色粉末，具古銅色光澤，易溶于水，呈藍紫色溶液。微溶于醇呈藍色，極微溶于氯仿，幾乎不溶于醚。商品大部分為氯化鋅復鹽。

甲苯胺藍屬噻嗪類染料,為堿性染料，可作細胞核染色劑。這類染料一般有2個發(fā)色團，一個是口印胺基, -個是醌型苯環(huán)。醌型苯環(huán)有明顯的異染性,可分別表示為a異染性(陰性)，呈藍色，即正染性;β異染性(弱陽 性) ,為紫色或紫紅色;γ-異染性(陽性),為紅色。 但此種異染性染色后經(jīng)酒精脫水時，又轉變成正色性。

肥大細胞的染色:

（1）組織脫蠟至水。

（2）蒸餾水浸洗2-3次。

（3）甲苯胺藍染液染20-30min。

（4）稍水洗，洗去多余染色液。

（5）95%酒精分色，在鏡下控制分色效果。

（6) 用100%酒精脫水。

（7）二甲苯透明，中性樹膠封片。

染色結果：

肥大細胞顆粒呈紅紫色，胞核呈藍色。

細胞涂片染色 ：

（1）細胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在紙巾上。

（2）滴加1～2滴稀釋后的甲苯胺藍染色液進行滴染，加蓋玻片讓染料滲透到細胞中。

（3）后將玻片豎起，稍加壓力，使多余染料被紙巾吸去。

（4）無需干燥，直接鏡檢。

染色結果：

細胞核、淋巴細胞呈深藍色；核仁呈紫紅色；紅細胞呈橘紅；細胞質(zhì)、單核細胞呈淡藍色。

原位雜交染色 ：

（1）用蒸餾水或去離子水稀釋到相應的濃度，憑經(jīng)驗一般稀釋比例大于1:10。

（2） 玻片在稀釋好的染色液中短暫浸泡。

（3） 在蒸餾水或去離子水浸泡數(shù)次。

（4） 按需求進行壓片固定。 

神經(jīng)元細胞的染色：

（1）將載有細胞的玻片取出放入4％多聚甲醛中固定1h左右；

（2）到時間后取出用PBS沖洗1～2次即可；

（3）然后加入提前預熱的1％甲苯胺藍溶液，在50度左右的氣浴或水浴中染色20～30min；

（4）用梯度酒精已次脫水，分別為75％、90％、100％，也可自定梯度；

（5）在鏡下控制分色效果，這一步不太好掌握；

染色結果：

可見尼氏小體深藍色顆粒，細胞核呈淡藍色，背景基本無色。

1.次使用本試劑時建議先取1-2個樣品做預實驗。樣品數(shù)量很多時，可使用染色架和染色缸，以便于操作。

2.本產(chǎn)品為1%濃度水溶液，具體使用濃度可自行稀釋。

3.由于溫度對染料的溶解度與著色力有很大的影響，若快速染色，當室溫較低時，可以適當加溫。

4.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。