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EDTA抗原修復液 (1X)
貨號:PMK2002
一鍵復制產品信息
價格:
60.00
規格:
100ml
500ml
貨期:
現貨
本產品4 ℃運輸,保存于4℃,保質期 12個月。
Details
產品詳情
  • 用途

    EDTA抗 原修復液( EDTAAntigen Retrieval solution,1×) 是一種常用的抗原修復液,可 以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、 甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。 細胞或組織用多聚甲醛、 甲醛或其它醛類試劑固定后,會導致蛋白之間的交聯(cross-link),從而遮蔽樣品 的抗原位點,導致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現一些假陽性染色結果 。本抗原修復液采用了廣泛使用 的 EDTA,可以有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯,充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而 大大改善免疫染色效果。 通常石蠟切片都需進行抗原修復處理,而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復會大大改善石蠟切片 的免疫染色效果,但對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯著改善。特別是當冰凍切片免疫染色 效果欠佳時,可以考慮嘗試進行抗原修復 。從原理上來看,無論冰凍切片還是細胞爬片等,只要是用多聚甲 醛、 甲醛或其它醛類試劑固定的樣品,進行抗原修復都會有效去除蛋白之間的交聯,充分暴露抗原表位,從 而大大改善免疫染色效果。本產品特別適合用于石蠟切片,也可以用于冰凍切片等其它樣品。 按照每個片子需要10ml抗原修復液(1×)計算, 100ml抗原修復液(1×)可以用于10個樣本的抗原修復。

  • 產品內容

    圖片.png

  • 使用步驟

    1. 對于石蠟切片: a. 脫蠟:切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘,再換用新鮮的二甲苯脫蠟,共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5 分鐘, 兩次。90%乙醇 5 分鐘,兩次,70%乙醇 5 分鐘,一次。蒸餾水 5 分鐘,兩次。 b.抗原修復:將切片浸泡在抗原 修復液(1X)中,95-100℃加熱約 15 分鐘(加熱時 間可以控制在 10-20 分鐘 內,佳的加熱時間需根據不同的 樣品和目的蛋白自行摸索)??乖迯鸵?1X)使 用前需預熱到 95-100℃ 。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以 使用微波爐加熱 。如果使用微波爐加熱,需注 意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻 至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。

    2. 對于冰凍切片: 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復液(1X)中,95-100℃加熱約 15 分鐘(加熱時間可 以控制在 10-20 分鐘內,佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1X)使用前需預熱到 95-100℃ 。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免 暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 分 鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。
    3. 對于其它樣品的抗原修復,可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。

  • 注意事項

    1.抗原修復過程可以使用染色缸和染色架或郵寄夾進行操作。塑料染色缸、染色架和郵寄夾可以很好地耐受 沸水浴,而玻璃染色缸需避免驟冷驟熱導致的玻璃破碎。
    2. 本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放 于普通住宅內。
    3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

Published literature
已發表文獻
  • 更新中...

Product Q&A FAQ
產品問答FAQ
  • Western Blot(WB)實驗中有很多雜帶咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;

    2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;

    3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;

    4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;

    5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;

    6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;

    7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;

    8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。


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