因光照、pH值及溫度等環(huán)境影響或者熒光分子和其它分子相互作用等因素,造成熒光分子的不可逆破壞。使用熒光顯微鏡和激光共 聚焦顯微鏡觀察時,可見信號減弱。抗熒光淬滅封片劑用于對熒光組織和細(xì)胞樣品的封片,添加獨有的抗熒光淬滅劑成分,兼容多種熒光染料,可保護(hù)整個可見光譜和紅外光譜,防止熒光信號淬滅;樣品封片后 4℃或-20℃避光保存2周以上,仍可維持原有發(fā)光強(qiáng)度。
抗熒光淬滅封片劑溶液: 即用型;無需預(yù)混組分。
I 貼壁細(xì)胞樣品:
1. 染色完畢后,吸盡液體。
2. 滴一滴增強(qiáng)型抗熒光淬滅劑于載玻片上,蓋上貼有細(xì)胞的蓋玻片,讓細(xì)胞接觸封片液,盡量避免氣泡。
3. 隨后即可在熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞樣品。
Ⅱ 組織切片:
1. 染色完畢后,吸盡液體。
2. 滴一滴增強(qiáng)型抗熒光淬滅劑于組織切片上,蓋上蓋玻片,讓切片接觸封片液,盡量避免氣泡。
3. 隨后即可在熒光顯微鏡下觀察組織切片。
Ⅲ 其它樣品:
其它樣品參考細(xì)胞樣品或組織切片進(jìn)行操作。
1. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,染色后的樣品宜避光保存。
2. 在使用增強(qiáng)型抗熒光淬滅劑的情況下可以減緩淬滅,但仍宜盡量避光和盡早拍照。
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1、抗原修復(fù)方法可能過于苛刻;
2、組織可能未充分固定;
3、組織切片從載玻片上脫落(冰凍切片);
4、組織切片撕裂或折疊,或切片下方可見氣泡;
5、組織形態(tài)難以分辨;
6、組織自溶。
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