臺盼藍(Trypan blue)又稱錐藍或錐蟲藍等，分子式為 C34H24N6Na4O14S4，分子量為 960.81，CAS Number 72-57-1，是一種陰離子型染料。Trypan blue 不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色，即產生 所謂的拒染現象,而死亡細胞的細胞膜通透性增加，可使染料通過細胞膜進入細胞內，使死細胞著色呈藍色， 是常用的檢測細胞活率的方法。通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經死亡，這與中性紅作用相 反。因此，借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養中常用 的死細胞鑒定染色方法之一。 Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測細胞膜的完整性以及細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色，而死細胞 會被染成淡藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬，故可用于巨噬細胞的活體染色劑。臺盼藍染色后，通過顯微鏡 下直接計數或顯微鏡下拍照后計數，就可以對細胞存活率進行比較精確的定量，0.4%為常用的濃度。
1、收集細胞： 如果收集貼壁細胞，應用胰蛋白酶-EDTA溶液消化細胞，收集細胞。如果收集懸浮細胞，則可直接收集細胞。 收集好的細胞在1000rpm離心5min，棄上清，用 1mL PBS重新懸浮細胞沉淀。
2、臺盼藍染色： 向細胞懸液中加入臺盼藍染色液（0.4%）輕輕混勻，臺盼藍終濃度為 0.04%，室溫染色3min（染色時間可適 當延長，但不宜超過10min）。
3、細胞計數： 吸取少量經過染色后的細胞，用血細胞計數板計數，鏡下可觀察到死細胞著藍色并膨大無光澤，活細胞不著 色，維持正常形態有光澤。通常如果要比較精確地進行定量，每個細胞樣品至少需要數500個細胞，數出藍色 細胞和細胞總數。細胞存活率計算公式如下： 細胞存活率＝（細胞總數－藍色細胞數）/細胞總數×100%。
1、Trypan blue stain 對人體有輕微毒性，請注意小心防護。
2、注意凋亡小體偶爾也有臺盼藍拒染現象。
3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
更新中
答：可能的原因包括培養基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有：
1. 使用高質量的培養基和血清，確保其無菌、無支原體污染，并保證在保質期內使用；
2. 培養箱溫度和氣體比例要保持穩定，定期校準；
3. 每天檢查并記錄細胞培養的環境參數，如溫度、pH值、氣體比例等，以便及時發現問題；
4. 定期更換培養基，保持細胞營養充足；
5. 對于生長緩慢的細胞株，可以嘗試進行克隆篩選或更換培養基。
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