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細胞培養中細胞生長緩慢或不生長的可能原因及解決方法
答:可能的原因包括培養基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質量的培養基和血清,確保其無菌、無支原體污染,并保證在保質期內使用;
2. 培養箱溫度和氣體比例要保持穩定,定期校準;
3. 每天檢查并記錄細胞培養的環境參數,如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時發現問題;
4. 定期更換培養基,保持細胞營養充足;
5. 對于生長緩慢的細胞株,可以嘗試進行克隆篩選或更換培養基。
二氫羅丹明123(Dihydrorhodamine 123),是一種不帶電荷的非熒光染料,是羅丹明123(R123)衍生物。存在活性氧物質的情況下,細胞內的二氫羅丹明123(DHR123)氧化為熒光R123,定位在線粒體中。它是2,7-二氯二氫熒光素(DCDHF)的類似物,具有親脂性,通過細胞膜擴散。可用于檢測頭腎來源巨噬細胞的細胞內自由基或ROS(活性氧物質),還用于紅細胞DHR測定和中性粒細胞氧化爆發測定。
二氫羅丹明123可檢測單細胞水平的超氧離子,可用于在呼吸爆發事件中探測中性粒細胞超氧化物的產生。也用于檢測巨噬細胞和人類精子的氧化應激情況。二氫羅丹明123可用于檢測ROS(活性氧物質)。ROS的存在可將二氫羅丹明123氧化成熒光衍生物羅丹明123。該反應可在過氧化物酶或類似催化劑存在下發生。
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答:可能的原因包括培養基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質量的培養基和血清,確保其無菌、無支原體污染,并保證在保質期內使用;
2. 培養箱溫度和氣體比例要保持穩定,定期校準;
3. 每天檢查并記錄細胞培養的環境參數,如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時發現問題;
4. 定期更換培養基,保持細胞營養充足;
5. 對于生長緩慢的細胞株,可以嘗試進行克隆篩選或更換培養基。
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