JC-10 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-10 聚集在線粒體的基質中,形成聚合物,可以產生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時,JC-10 不能聚集在線粒體的基質中,此時 JC-10 為單體,可以產生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。
線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過 JC-10 從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降,同時也可以用JC-10 從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。JC-10 單體的大激發波長為 515nm ,大發射波長為529nm ;JC-10 聚合物的大激發波長為585nm ,大發射波長為590nm 。實際觀察時,使用常規的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。
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答:可能的原因包括培養基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質量的培養基和血清,確保其無菌、無支原體污染,并保證在保質期內使用;
2. 培養箱溫度和氣體比例要保持穩定,定期校準;
3. 每天檢查并記錄細胞培養的環境參數,如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時發現問題;
4. 定期更換培養基,保持細胞營養充足;
5. 對于生長緩慢的細胞株,可以嘗試進行克隆篩選或更換培養基。
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