該細(xì)胞是LS180結(jié)腸腺癌細(xì)胞株的胰蛋白酶化變種。它比親本更易傳代，像LS180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明，它有豐富的微絲和胞漿黏液素液泡；血清學(xué)檢測(cè)直腸抗原3陽性；p53抗原表達(dá)陰性，但mRNA表達(dá)陽性；角蛋白陽性；癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表達(dá)呈陽性；癌基因k-ras和sis的表達(dá)未做檢測(cè)；可產(chǎn)生IL-10、IL-6和黏蛋白。
1） 來源：人，結(jié)腸
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，長梭形，不規(guī)則形，邊緣不規(guī)則
3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝
5）用途：僅供科研使用
（1）1mL 凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收 到后-80 度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存 管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
（2）T25 瓶復(fù)蘇的存活 細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況，若細(xì)胞密度在70%-80%左右，可進(jìn)行傳代，首次傳代建議1:2(也可根據(jù)情況調(diào)整)，若細(xì)胞生長不足70%，建議消化處理后，轉(zhuǎn)移到新的T25培養(yǎng)瓶（1：1）繼續(xù)培養(yǎng)。
4）半貼細(xì)胞或貼壁不牢（懸浮）細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況，若細(xì)胞密度在60%以下，客戶需收集T25瓶中的懸浮細(xì)胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，若細(xì)胞生長70%-90%對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代，傳代時(shí)需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細(xì)胞離心后回收。
5）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌注培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
1）準(zhǔn)備培養(yǎng)基；MEM，10%FBS
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5% 。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱 濕度為 70%-80%。
3）凍存液： 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS ，現(xiàn)用現(xiàn)配
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答：可能的原因包括培養(yǎng)基質(zhì)量、血清質(zhì)量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有：
1. 使用高質(zhì)量的培養(yǎng)基和血清，確保其無菌、無支原體污染，并保證在保質(zhì)期內(nèi)使用；
2. 培養(yǎng)箱溫度和氣體比例要保持穩(wěn)定，定期校準(zhǔn)；
3. 每天檢查并記錄細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境參數(shù)，如溫度、pH值、氣體比例等，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題；
4. 定期更換培養(yǎng)基，保持細(xì)胞營養(yǎng)充足；
5. 對(duì)于生長緩慢的細(xì)胞株，可以嘗試進(jìn)行克隆篩選或更換培養(yǎng)基。
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