SVG p12細胞是從8至12周齡胚胎的腦中分離的人胎兒神經膠質細胞后經SV40突變體的DNA轉染得到,其表達SV40 T抗原。SVG p12細胞易受JC病毒感染,可用于檢測和培養其他人類嗜神經病毒
1)來源: 腦,星形膠質瘤;SV40轉染
2)形態: 成纖維細胞樣,貼壁生長
3)含量: >1x106 細胞數
4)規格: T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途: 僅供科研使用
干冰運輸及復蘇好存活細胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80 度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:T25瓶置于37℃培養箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在70%-80%左右,可進行傳代,首次傳代建議1:2(也可根據情況調整),若細胞生長不足70%,建議消化處理后,轉移到新的T25培養瓶(1:1)繼續培養。
4)半貼細胞或貼壁不牢(懸浮)細胞:T25瓶置于37℃培養箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用完全培養基重懸后打回到原培養瓶中繼續培養,若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代,傳代時需要收集培養基中懸浮的細胞離心后回收。
5)備注:運輸用的培養基(灌注培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代
1)準備培養基:DMEM培養基;10%胎牛血清;1%雙抗
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 。 溫度:37 攝氏度,培養箱 濕度為 70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作, 并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意: 凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能 導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害
更新中
答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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