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本胰酶細(xì)胞消化液含0.25%胰酶、0.02%EDTA和酚紅，不含Ca2+和Mg2+。該消化液已用0.22um濾膜過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化，或者一些組織的消化。本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn)，通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。

1.貼壁細(xì)胞的消化:

a）吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

b）加入少量胰酶細(xì)胞消化液，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。 

c）顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

d）如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。

e）如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及時(shí)吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g 離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2. 組織的消化: 不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

1. 在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。

2. 胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴-次性手套操作。