本胰酶細胞消化液含0.25%胰酶和0.02%EDTA，不含酚紅、Ca2+和 Mg2+。該消化液已用 0.22um 濾膜過濾除菌， 可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化，或者一些組織的消化。本胰酶細胞消化液具有方便快速的特點，通常室溫消 化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。
1.貼壁細胞的消化:
a）吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
b）加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。
c）顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
d）如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。
e）如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及時吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心1分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2. 組織的消化: 不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
1. 在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
2. 胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴-次性手套操作。
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答：可能的原因包括培養(yǎng)基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有：
1. 使用高質量的培養(yǎng)基和血清，確保其無菌、無支原體污染，并保證在保質期內使用；
2. 培養(yǎng)箱溫度和氣體比例要保持穩(wěn)定，定期校準；
3. 每天檢查并記錄細胞培養(yǎng)的環(huán)境參數(shù)，如溫度、pH值、氣體比例等，以便及時發(fā)現(xiàn)問題；
4. 定期更換培養(yǎng)基，保持細胞營養(yǎng)充足；
5. 對于生長緩慢的細胞株，可以嘗試進行克隆篩選或更換培養(yǎng)基。
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