絕大多數正常細胞被認為僅有有限的分裂能力,在不能分裂后就進入衰老(senescence)狀態。衰老的細胞不能在一些常規的刺激下再誘導細胞分裂,并且衰老細胞的細胞周期分布也比較特殊,不同于一些損傷誘導的細胞休眠,也不同于細胞生長接觸抑制的情況。衰老細胞通常體積變大,并表達在pH6.0時有高酶活性的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase),這被認為是細胞衰老的生物標記。本試劑盒是一種基于衰老時衰老相關β-半乳糖苷酶活性水平上調而對衰老細胞或組織進行染色檢測的試劑盒。其原理是以 X-Gal為底物,在 pH 6.0 條件下,衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化會生成深藍色產物,從而在光學顯微鏡下觀察到變成藍色的表達β-半乳糖苷酶的細胞或組織。本試劑盒適用于培養細胞和組織切片的衰老檢測,但僅染色衰老細胞,不會染色衰老前的細胞(presenescent cells)、靜止期細胞(quiescent cells)、永生細胞(immortal cells)或腫瘤細胞。
顯微鏡、無 CO2的37℃培養箱
6孔板、移液器及槍頭、封口膜
聚丙烯管(15 or 50mL)、制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿
去離子水、甘油
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答:可能的原因包括培養基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質量的培養基和血清,確保其無菌、無支原體污染,并保證在保質期內使用;
2. 培養箱溫度和氣體比例要保持穩定,定期校準;
3. 每天檢查并記錄細胞培養的環境參數,如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時發現問題;
4. 定期更換培養基,保持細胞營養充足;
5. 對于生長緩慢的細胞株,可以嘗試進行克隆篩選或更換培養基。
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