RIPA(中)裂解液是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的PAGE、Western、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。
本產品可以用于動物、植物的細胞或組織樣品,也可以用于真菌或細菌樣品。RIPA(中)裂解液的主要成分為Tris(pH 7.4),NaCl,1% NP-40,0.5% 脫氧膽酸鈉,0.1% SDS,以及原釩酸鈉,氟化鈉,EDTA,leupeptin等多種抑制劑,可以有效抑制蛋白降解。
用RIPA(中)裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度
1. 本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
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1.Wei Q ,ChengShi X ,XiaoChong L , et al.Telmisartan inhibits microglia-induced neurotoxic A1 astrocyte conversion via PPARγ-mediated NF-κB/p65 degradation.[J].International immunopharmacology,2023,123110761-110761.(IF 5.6)
答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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