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本試劑盒用于從哺乳動物組織和培養細胞中提取總蛋白，用裂解液勻漿裂解組織或細胞，作用溫和，提取過程簡便高效，可快速獲得總蛋白。獲得的總蛋白可用于報告基因檢測、蛋白質純化、Western Blot 、免疫共沉淀等后續研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶的研究，因本試劑盒中包括這兩種酶的抑制劑。

實體組織蛋白的提取

1.在1ml的冷裂解液中加入20ul的磷酸酶抑制劑、10ul蛋白酶抑制劑和10ulPMSF混勻，放置在冰上備用；

2. 稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5- 1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；

3. 將組織勻漿液移入1.5ml預冷的EP管中，4℃12000g離心10min；

4. 吸取上清至新的預冷的離心管中，即為總蛋白提取物；

5.進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。(提取好的蛋白建議保存于-80℃，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存) 

培養細胞蛋白提取

1.裂解液的用量和配制：10⁷個細胞需要裂解液1ml，每1ml的冷裂解液中加入20ul的磷酸酶抑制劑、10ul蛋白酶抑制劑和10ulPMSF混勻，放置在冰上備用；

2. 貼壁細胞：棄去培養基，加入10ml/150mm培養板冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細胞裂解液，在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞，將刮離的細胞裂解液移入預冷的EP管中，顛倒裂解20-30min。

3. 懸浮細胞：4℃500g~ 800g離心10min收集細胞，再用10ml/150mm培養板冷的PBS洗兩次細胞，500g~ 800g離心去上清。同樣按細胞數加入裂解液，渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復3-4次；

4. 裂解完畢之后，將細胞裂解液4℃12000g離心10min，取上清為總蛋白提取物；

5. 將上清移入新的EP管中；進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。(提取好的蛋白建議保存于-80℃，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存)