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本試劑盒用于從哺乳動物組織和培養(yǎng)細胞中提取核蛋白，用裂解液勻漿裂解組織或細胞，作用強力，提取過程簡便高效，可快速獲得核蛋白。獲得的總蛋白可用于報告基因檢測、蛋白質(zhì)純化、Western Blot、免疫共沉淀等 后續(xù)研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶的研究，因本試劑盒中包括這兩種酶的抑制劑。

組織核蛋白的提取

1.提取液的用量和配制：每0.1g組織需要0.75-1ml核蛋白提取液；每1ml冷的核蛋白提取液中加入20ul磷酸酶抑制劑混合物、10ul蛋白酶抑制劑混合物和10ul PMSF混勻，放置在冰上備用；

2. 稱取新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能剪碎，然后加新配置的核蛋白提取液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；

3. 將組織勻漿液移入1.5ml 預(yù)冷的EP 管中，高速渦旋振蕩5秒，4℃ 12000 g 離心10min；

4. 吸取上清至新的預(yù)冷的離心管中，即為核蛋白提取物；

5. 進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗 。( 提取好的蛋白建議保存于-80℃，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時 間儲存)

細胞核蛋白的提取

1. 提取液的用量和配制：107個細胞需要0.75-1ml核蛋白提取液；每1ml的冷的核蛋白提取液中加入20ul的磷酸酶抑制劑混合物、10ul蛋白酶抑制劑混合物和10ul PMSF混勻，放置在冰上備用；

2. 貼壁細胞：棄去培養(yǎng)基，加入冷的PBS清洗，棄去PBS后加入胰酶消化液消化30s-2min，4℃1200g離心10min收集細胞，再用冷的PBS清洗一次，后按細胞數(shù)加入核蛋白提取液，渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)2-3次；

3. 懸浮細胞：4℃ 500g~800g離心10min收集細胞，再用預(yù)冷的PBS洗兩次細胞，500g~800g離心去上清。按細胞 數(shù)加入核蛋白提取液，渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)2-3次；

4. 裂解完畢之后，將細胞裂解液4℃12000g離心10min，取上清為核蛋白提取物；

5. 將上清移入新的EP管中，進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。(提取好的蛋白建議保存于-80℃，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存)