本產(chǎn)品的主要有效成分為經(jīng)過反復(fù)優(yōu)化的適量BSA、適當(dāng)?shù)娜ス竸┖投狗€(wěn)定試劑等，一方面能有效減少二抗的非特異性結(jié)合，另一方面能有效提升稀釋后二抗的穩(wěn)定保存時間。
按照每個二抗稀釋10毫升計算，一個包裝的Western二抗稀釋液可以稀釋10個或10次二抗。
參考所用的二抗的使用說明，以及一抗的質(zhì)量和樣品中目的蛋白的含量，按照適當(dāng)比例例如1:1000、1:500等比例稀釋二抗。二抗稀釋后即可直接用于Western。一次Western結(jié)束后，可以回收稀釋的二抗，4℃保存，以用于下次的Western，通常在1-2周內(nèi)可以重復(fù)使用3-5次。
本W(wǎng)estern二抗稀釋液經(jīng)過濾除菌處理，使用過程中應(yīng)盡量避免細(xì)菌污染。一旦啟用后建議在一個月內(nèi)用完，如果發(fā)現(xiàn)有沉淀或細(xì)菌污染請棄用。本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現(xiàn)多條帶，建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng)，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
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