免疫染色二抗稀釋液(非熒光)是用于非熒光的免疫染色實驗中的常用試劑,因為抗體為了保證其標記物具有較高的活性,所以一般都是以較高的濃度保存運輸,在免疫染色中為了獲得較好的染色效果都需要對抗體進行適當的稀釋。經本產品稀釋的二抗可以 4℃保存 1-2 周,可反復使用 3-5 次。
1. 本產品無需稀釋,開蓋即用。
2. 按照抗體使用說明,根據比例稀釋即可。
1. 本免疫染色二抗稀釋液(非熒光)經過濾除菌處理,使用過程中應盡量避免細菌污染。一旦啟用后建議在一個月內用完,如果發現有沉淀或細菌污染請棄用。
2. 本產品屬蛋白制劑,室溫放置過久易導致蛋白的降解和活性喪失。
3. 反復凍融亦會導致蛋白活性的喪失。
4. 本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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