檢測范圍:1.56-100ng/mL 靈敏度:0.8 ng/mL
精密度:板內(nèi)變異系數(shù)<8%,板間變異系數(shù)<11%
回收率:范圍從 91%到 101%,平均回收率 96%
特異性:檢測具有高靈敏度和優(yōu)良的特異性。未觀察到和通用游離三碘甲狀腺原氨酸 (fT3) 類似物之間的顯著交叉反應(yīng)或干擾。
適用樣本:血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清和其他生物體液
該試劑盒采用競爭抑制酶聯(lián)免疫吸附法原理。酶標(biāo)板預(yù)包被親和純化的抗 fT3的抗體。將待測抗原(標(biāo)準(zhǔn)品或樣本)和生物素標(biāo)記的抗原加入到酶標(biāo)板中,它們對固相抗體進行競爭結(jié)合。接著洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì),加入鏈酶親和素-辣根過氧化物酶(SA-HRP)以形成固相抗體-生物素標(biāo)記抗原-SA-HRP的復(fù)合物。然后,將 TMB 溶液加入孔中并進行孵育,酶促反應(yīng)產(chǎn)生藍色物質(zhì),加入終止液后,變成黃色。顏色深淺與樣本中待測抗原的含量呈現(xiàn)負相關(guān)。在450nm 波長下測定吸光值。后通過建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù) OD 值來計算樣品中 fT3的濃度。
1. 實驗過程中請穿戴實驗服、口罩和乳膠手套。請按照生物實驗室的國家安全規(guī)定進行實驗,尤其是在檢測血樣或其他體液時。終止液有一定的腐蝕性,操作時請做好防護措施。
2. 本試劑盒僅用于實驗室科學(xué)研究,如果本試劑盒用于臨床診斷或任何其他用途,我們將不對任何后果負責(zé)。
3. 本試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,并請嚴格按照說明書進行存儲。收到試劑盒后,未開封的試劑盒可在2-8℃下保存1個月。如果試劑盒在1個月內(nèi)不使用,請在收到試劑盒后,將每個組件分別存放在上表中指示的溫度下。
4. 新打開的ELISA酶標(biāo)板可能含有水霧樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果產(chǎn)生任何影響。未用完的板條應(yīng)立即放回裝有干燥劑的鋁箔袋中,重新密封并在-20℃下存儲。
5. 不同批次號、不同廠家之間的組分不要混用;否則,可能導(dǎo)致結(jié)果異常。
6. 勤換吸頭,避免各組分之間的交叉污染。
7. 溶解含有蛋白質(zhì)溶液時,應(yīng)始終避免起泡。
8. 不得重復(fù)使用稀釋后的工作液。
9. 為了得到準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,在孵育過程中,必須確保封板膜將酶標(biāo)板密封。
10. 在使用自動洗板機時,添加清洗緩沖液后,在清洗步驟之間添加30秒的浸泡時間可提高分析精度。
11. 底物溶液(TMB)保存過程中應(yīng)為無色,加入到酶標(biāo)板中之后底物溶液應(yīng)從無色變?yōu)闈u變藍色。
12. 終止液應(yīng)按照與加底物溶液(TMB)相同的順序添加到酶標(biāo)板中。添加終止液后,孔中溶液的顏色將從藍色變?yōu)辄S色。綠色的孔表明終止液未與底物溶液充分混合,應(yīng)輕拍孔板使其混勻。
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可能原因 解決措施是
1,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確。 確保標(biāo)準(zhǔn)品按照推薦方法溶解和稀釋。
2,移液不準(zhǔn)確。 定期校準(zhǔn)移液器并檢查槍頭密封性。
3,反應(yīng)液蒸發(fā)。 用封板膜密封酶標(biāo)板。
4,洗板不徹底。 足夠的洗滌次數(shù)和加入足量洗滌液。
5,孔底有異物。 讀數(shù)前清潔板底。
可能原因 解決措施是
1,試劑反應(yīng)不充分 確保孵育時間并按推薦溫度孵育
2,試劑體積添加不足 檢查移液器并嚴格按照操作步驟操作
3,稀釋不正確 檢查試劑稀釋步驟
4,酶結(jié)合物失活 混合酶結(jié)合物和底物,通過顯色反應(yīng)檢查
可能原因 解決措施是
1,酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 檢查儀器波長
2,沒加終止液 加入適量終止液
3,讀板時等待時間太長 及時讀板
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