NAD激酶（NAD+ Kinase, NADK, EC 2.7.1.23）廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中，是目前發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)唯一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷?；w進行磷酸化反應(yīng)，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測生物樣本中NADK的活性水平。其原理是在測定中，樣本中存在的NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH，NADPH在340nm處有特征吸收峰，通過在340nm下測定NADPH增加速度（吸光值的變化）可反映出NADK活性。
酶標儀或紫外分光光度計（能測340nm處的吸光度）及水浴鍋
96孔UV板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
更新中...
答：可能的原因有：
1、膜沒有完全均勻濕透,建議 使用100% methanol浸透膜；
2、洗膜不充分，可以增加洗液體積和洗滌次數(shù)；
3、電極不平衡或者加樣位置偏斜，可以調(diào)整電極和加樣；
4、封閉物用量不足，可以提高封閉物濃度，孵育時保證封閉液完全浸沒轉(zhuǎn)印膜；
5、封閉物使用不當，比如檢測生物素標記的蛋白時不可用脫脂奶粉封閉；
6、封閉時間不夠，一般情況下室溫37度封閉1小時以上或者4度封閉過夜；
7、抗體非特異性結(jié)合，可以降低抗體濃度，減少孵育時間；
8、一抗稀釋度不適宜，可以對抗體進行滴度測試，選擇適宜的抗體稀釋度；
9、一抗孵育的溫度偏高，建議4℃結(jié)合過夜；
10、抗體濃度過高或洗滌不夠，建議降低抗體濃度，增加洗滌次數(shù)和時間；
11、化學顯色底物過多，建議按說明書加入適量的顯色底物。
Copyright ?湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部備案：鄂ICP備17001029號-1 技術(shù)支持：武漢微盟
