MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物，連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH，細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH，在真核細(xì)胞中，NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。本試劑盒提供了一種簡單、方便、快速的NAD-MDH活性檢測方法，其原理是NADH在340nm處有特征吸收峰，NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。在340nm下測定NADH減少的速率可計(jì)算獲得NAD -MDH的活性。
酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)（能測340nm處的吸光度）
96孔UV板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
水浴鍋、制冰機(jī)，低溫離心機(jī)
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：可能的原因有：
1、膠凝的不均勻或聚合不好，建議灌膠前將溶液充分混勻；
2、某些樣品鹽濃度較高，建議除鹽或?qū)悠符}濃度調(diào)成一致；
3、緩沖液陳舊，成分改變,可以重配；
4、凝膠下面有氣泡,電泳前要先將氣泡趕走；
5、電泳時(shí)溫度過高，可以降低電流或電壓；
6、樣品中含有不溶性顆粒，建議樣品充分?jǐn)嚢杌靹颉?/p>
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