MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物,連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。本試劑盒提供了一種簡單、方便、快速的NADP-MDH活性檢測方法,其原理是NADPH在340nm處有特征吸收峰,NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。在340nm下測定NADPH減少的速率可計算獲得NADP-MDH的活性。
酶標(biāo)儀或分光光度計(能測340nm處的吸光度)
96孔UV板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
水浴鍋、制冰機(jī),低溫離心機(jī)
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
1. 實驗過程中請穿戴實驗服、口罩和乳膠手套。請按照生物實驗室的國家安全規(guī)定進(jìn)行實驗,尤其是在檢測血樣或其他體液時。
2. 本試劑盒僅用于實驗室科學(xué)研究,如果本試劑盒用于臨床診斷或任何其他用途,我們將不對任何后果負(fù)責(zé)。
3. 本試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,并請嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行存儲。
4. 不同批次號、不同廠家之間的組分不要混用;否則,可能導(dǎo)致結(jié)果異常。
勤換吸頭,避免各組分之間的交叉污染。
更新中...
答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現(xiàn)在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強(qiáng),將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩(wěn)定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應(yīng)位置;
4、一抗選擇不當(dāng);
5、二抗失活。
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