蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關鍵酶之一，特異地催化非還原糖中的α-呋喃果糖苷鍵水解, 具有相對專一性。不僅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖 , 也能催化棉子糖水解, 生成密二糖和果糖。蔗糖酶廣泛存在于動植物和微生物中，在植物的運輸貯藏、碳水化合物代謝中發揮主要作用．并在滲透調節、抗逆性生長繁殖、以及信號傳導方面也發揮著重要的作用。本試劑盒提供了一種檢測蔗糖酶活性的便捷方法，其原理是蔗糖酶水解蔗糖水解生成還原糖，3,5-二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物，在540nm有特征吸收峰。在一定范圍內酶活力大小與還原糖的量也就是反應液540nm吸光度成正比。測定540nm吸光度的變化可計算蔗糖酶活力。
酶標儀或可見光分光光度計（能測540nm處的吸光度）
水浴鍋、制冰機、低溫離心機
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
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