硫氧還蛋白還原酶(TrxR)是一種NADPH依賴的二聚體硒酶,包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及 NADPH 共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。 TrxR與GR活性類似,催化GSSG還原生成GSH,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測生物樣本,如血清(漿)、動(dòng)植物組織、細(xì)胞及細(xì)菌樣本中TrxR的活性。TrxR催化催化NADPH還原GSSG生成GSH和NADP+,DTNB與GSH反應(yīng)生成黃色產(chǎn)物TNB,TNB在412 nm有特征吸收峰,通過測定412nm波長處TNB的增加速率,即可計(jì)算TrxR活性。
酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(jì)(能測412 nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
恒溫箱、制冰機(jī)、低溫離心機(jī)
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:如果能夠排除下面的幾個(gè)問題,那么問題多半出現(xiàn)在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強(qiáng),將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩(wěn)定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應(yīng)位置;
4、一抗選擇不當(dāng);
5、二抗失活。
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