亞硝酸還原酶（Nitrite reductase，NiR）是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶，是亞硝態氮還原過程中的關鍵酶。NiR廣泛存在于微生物及植物體內，在自然界氮素循環過程中發揮著重要作用，可以將亞硝酸鹽降解為NO或 NH3，從而減少環境中亞硝態氮的積累，降低因亞硝酸鹽累積而造成的對生物體的毒害作用。本試劑盒提供了一種簡單的比色法來檢測NiR。其原理是亞硝酸鹽（NO2—）能夠在酸性條件下，與對–氨基苯磺酸及α-萘胺定量生成紅色偶氮化合物；生成的紅色偶氮化合物在540nm有大吸收峰。亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣本中參與重氮化反應生成紫紅色化合物的NO2-減少，即540nm處吸光值減少。通過測定540nm處的吸光值的變化可反映亞硝酸還原酶的活性。
酶標儀或可見光分光光度計（能測540nm處的吸光值）以及恒溫箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
低溫離心機、制冰機
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：如果能夠排除下面的幾個問題，那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強，將底物消耗光；
2、ECL底物中H2O2不穩定，失活；
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置；
4、一抗選擇不當；
5、二抗失活。
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