磷酸果糖激酶（PFK，EC 2.7.1.11），又稱為6-磷酸果糖激酶或果糖-6-磷酸激酶，存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，負責將果糖-6-磷酸和ATP轉化為果糖-1,6二磷酸和ADP，是糖酵解過程的關鍵調節酶之一。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法，用于檢測生物樣本中磷酸果糖激酶（PFK）活性。其原理是PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+，NADH在340nm有特征吸收峰，而NAD+沒有，通過測定340nm光吸收下降速率，即可反映PFK活性。
酶標儀或紫外分光光度計（能測340nm處的吸光度）及恒溫培養箱
96孔UV板或微量石英比色皿、移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：可能的原因有：
1、膠濃度不對，不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差，可以調整濃度；
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度，延長孵育時間；
3、酶失活，建議直接將酶和底物進行混合，如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物；
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體，建議查詢相關文獻確定；
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建議設置陽性對照比對結果，增加標本上樣量。
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