草酰乙酸在三羧酸循環的步中與乙酰輔酶A縮合生成檸檬酸,并在后一步通過蘋果酸脫氫酶催化L-蘋果酸脫氫再生。它是糖異生的中間體,通過丙酮酸的羧化作用在線粒體中由丙酮酸與CO2生成,隨后脫羧和磷酸化形成磷酸烯醇式丙酮酸。另外,它也可以在轉氨酶的作用下添加來自谷氨酸的氨基而轉化為天冬氨酸。草酰乙酸可降低閉合性頭部損傷大鼠模型中的血液谷氨酸水平、神經功能障礙的嚴重程度和腦水腫。已知也可作為琥珀酸脫氫酶的抑制劑。本試劑盒提供了一種簡單、方便、快速的草酰乙酸含量檢測方法,其原理是草酰乙酸與固紫B結合形成紅色沉淀物質,加入有機溶劑溶解沉淀后,溶液在520nm處有特征吸光值,通過檢測520nm處光吸收增加速率可以計算草酰乙酸含量。
酶標儀或分光光度計(能測520nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
水浴鍋、制冰機,低溫離心機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因包括培養基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質量的培養基和血清,確保其無菌、無支原體污染,并保證在保質期內使用;
2. 培養箱溫度和氣體比例要保持穩定,定期校準;
3. 每天檢查并記錄細胞培養的環境參數,如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時發現問題;
4. 定期更換培養基,保持細胞營養充足;
5. 對于生長緩慢的細胞株,可以嘗試進行克隆篩選或更換培養基。
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