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本試劑盒提供了簡(jiǎn)單又快速的12.5% SDS-PAGE彩色(紅色)凝膠配制試劑，采用上層膠(也稱濃縮膠、積層膠)和下層膠(也稱分離膠)的預(yù)混配方，只需加入改良型促凝劑即可快速制備凝膠，避免的傳統(tǒng)制膠法中TEMED的惡臭味，保護(hù)了實(shí)驗(yàn)人員的身體健康，可在短時(shí)間內(nèi)制備多塊凝膠，無(wú)需計(jì)算所需溶液量，無(wú)需稀釋，操作簡(jiǎn)便，無(wú)需壓膠操作。且使用本產(chǎn)品所配置的上層膠帶有顏色(紅色)，使得蛋白點(diǎn)樣孔清晰呈現(xiàn)，實(shí)現(xiàn)了加樣過(guò)程的可視化，極大的提高了加樣效率，有利于點(diǎn)樣和控制電泳進(jìn)程。本產(chǎn)品上層膠中的(紅色)染料可在上層膠中穩(wěn)定存在，不會(huì)隨著電泳而遷移至下層膠，不會(huì)影響電泳和蛋白染色效果，電泳完成后也便于識(shí)別上層膠并切除，不影響后續(xù)Western Blot等實(shí)驗(yàn)。

本產(chǎn)品的改良型促凝劑具有更好的穩(wěn)定性和催化效能，配制過(guò)程中無(wú)需額外添加TEMED。為確保實(shí)驗(yàn)效果和方便吸取使用，已開蓋使用過(guò)的改良型促凝劑可置于4°C保存至少3個(gè)月。

本試劑盒可制備厚度0.75mm常規(guī)尺寸的凝膠50塊，具體配制的凝膠塊數(shù)量與凝膠的厚薄以及凝膠大小有關(guān)。

(以一塊0.75/1.0/1.5mm的mini膠為例)

1. 取等體積下層膠溶液和下層膠緩沖液沖液，各2.0/2.7/4.0mL,輕輕混勻。

2. 向步驟1的混合溶液中加入40/60/80μl的改良型促凝劑，輕輕混勻。

3. 將步驟2的混合溶液注入制膠玻璃板中，使液面和短玻璃板上沿之間的距離比梳齒長(zhǎng)0.5cm即可。

4. 取等體積上層膠溶液和彩色上層膠緩沖液，各0.5/0.75/1.0mL,輕輕混勻。（由于染料的特殊理化性質(zhì)，使用前請(qǐng)搖勻）

5. 向步驟4的混合溶液中加入10/15/20μl的改良型促凝劑，輕輕混勻。

6. 灌制完下層膠，無(wú)需壓膠，無(wú)需等待下層膠凝固，立即在下層膠液上面，緩慢將步驟5的混合溶液注入制膠玻璃板中，注意請(qǐng)勿過(guò)快，否則會(huì)沖散下層膠液面，灌滿后插入梳子待凝固（約20- 30min）。

7. 待上層膠凝固后，拔去梳齒即可用于電泳。

1. 請(qǐng)盡量使用新鮮配制的電泳緩沖液。

2. 本產(chǎn)品制備出的上層膠和下層膠與傳統(tǒng)的濃縮膠和分離膠配方一致，針對(duì)10-60kDa的蛋白都能有很好的濃縮和分離效果，如果針對(duì)更大分子量的蛋白，建議選用普美克的10% SDS-PAGE彩色凝膠快速配制試劑盒(PMK1014)效果更好；針對(duì)更小分子量的蛋白，建議選用普美克的15% SDS-PAGE彩色凝膠快速配制試劑盒(PMK1017)效果更好。

3. 改良型促凝劑的使用量?jī)H作參考,實(shí)際用量可根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)習(xí)慣和經(jīng)驗(yàn)調(diào)整，加入較多量的促凝劑可加速凝膠，反之亦然。

4. 凝膠速度與溫度有顯著的正相關(guān)性。同等條件下，溫度越高，凝膠速度越快，室溫過(guò)高時(shí)建議適當(dāng)減小改良型促凝劑的用量，室溫較低時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)凝膠時(shí)間。

5. 本產(chǎn)品已加入適量TEMED的替代品，如需進(jìn)一步加速  凝膠，臨配膠前可按需補(bǔ)充適量TEMED。

6. 在配膠之前，使膠溶液及緩沖液平衡到室溫(如室溫放置幾分鐘)，可有效避免凝膠中氣泡的形成。

7. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

8. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。