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一步法15%SDS-PAGE快速配膠試劑盒(紅色)
貨號(hào):PMK1017B
一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
價(jià)格:
150.00
規(guī)格:
50T
貨期:
次日貨
本產(chǎn)品4 ℃運(yùn)輸,保存于4℃,保質(zhì)期 12個(gè)月。
Details
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

    本試劑盒提供了簡(jiǎn)單又快速的15% SDS-PAGE彩色(紅色)凝膠配制試劑,采用上層膠(也稱濃縮膠、積)和下層膠(也稱分離膠)的預(yù)混配方,只需加入改良型促凝劑即可快速制備凝膠,避免的傳統(tǒng)制膠法中TEMED的惡臭味,保護(hù)了實(shí)驗(yàn)人員的身體健康,可在短時(shí)間內(nèi)制備多塊凝膠,無需計(jì)算所需溶液量,無需稀釋,操作簡(jiǎn)便無需壓膠操作。且使用本產(chǎn)品所配置的上層膠帶有顏色(紅色),使得蛋白點(diǎn)樣孔清晰呈現(xiàn),實(shí)現(xiàn)了加樣過程的可視化,極大的提高了加樣效率,有利于點(diǎn)樣和控制電泳進(jìn)程。本產(chǎn)品上層膠中的(紅色)染料可在上層膠中穩(wěn)定存在,不會(huì)隨著電泳而遷移至下層膠,不會(huì)影響電泳和蛋白染色效果,電泳完成后也便于識(shí)別上層膠并切除,不影響后續(xù)Western Blot等實(shí)驗(yàn)。

    本產(chǎn)品的改良型促凝劑具有更好的穩(wěn)定性和催化效能,配制過程中無需額外添加TEMED。為確保實(shí)驗(yàn)效果和方便吸取使用,已開蓋使用過的改良型促凝劑可置于4°C保存至少3個(gè)月。

    本試劑盒可制備厚度0.75mm常規(guī)尺寸的凝膠50塊,具體配制的凝膠塊數(shù)量與凝膠的厚薄以及凝膠大小有關(guān)。


  • 產(chǎn)品內(nèi)容

    圖片.png

  • 使用說明

    (以一塊0.75/1.0/1.5mmmini膠為例)

    1. 取等體積下層膠溶液和下層膠緩沖液沖液,各2.0/2.7/4.0mL,輕輕混勻

    2. 向步驟1的混合溶液中加入40/60/80μl的改良型促凝劑,輕輕混勻

    3. 將步驟2的混合溶液注入制膠玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之間的距離比梳齒長(zhǎng)0.5cm即可

    4. 取等體積上層膠溶液和彩色上層膠沖液,各0.5/0.75/1.0mL,輕輕混勻。(由于染料的特殊理化性質(zhì),使用前請(qǐng)搖勻

    5. 向步驟4的混合溶液中加入10/15/20μl的改良型促凝劑,輕輕混勻

    6. 灌制完下層膠,無需壓膠,無需等待下層膠凝固,立即在下層膠液上面,緩慢步驟5的混合溶液注入制膠玻璃板中,注意請(qǐng)勿過快,否則會(huì)沖散下層膠液面灌滿后插入梳子待凝固(約20- 30min

    7. 待上層膠凝固后拔去梳齒即可用于電泳。

    圖片.png

  • 注意事項(xiàng)

    1. 請(qǐng)盡量使用新鮮配制的電泳緩沖液。

    2. 本產(chǎn)品制備出的上層膠和下層膠與傳統(tǒng)的濃縮膠和分離膠配方一致,針對(duì)10-40kDa的蛋白都能有很好的濃縮和分離效果,如果針對(duì)更大分子量的蛋白,建議選用普美克的12.5% SDS-PAGE彩色凝膠快速配制試劑盒(PMK1015)效果更好。

    3. 改良型促凝劑的使用量?jī)H作參考,實(shí)際用量可根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)習(xí)慣和經(jīng)驗(yàn)調(diào)整加入較多量的促凝劑可加速凝膠,反之亦然

    4. 凝膠速度與溫度有顯著的正相關(guān)性。同等條件下,溫度越高,凝膠速度越快,室溫過高時(shí)建議適當(dāng)減小改良型促凝劑的用量,室較低時(shí),可適當(dāng)延長(zhǎng)凝膠時(shí)間

    5. 本產(chǎn)品已加入適量TEMED的替代品,如需進(jìn)一步加速  凝膠,臨配膠前可按需補(bǔ)充適量TEMED

    6. 在配膠之前,使膠溶液及緩沖液平衡到室溫(如室溫放置幾分鐘),可有效避免凝膠中氣泡的形成

    7. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服戴一次性手套操作

    8. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

Instruction manual/COA download
說明書/COA下載
Published literature
已發(fā)表文獻(xiàn)
  • 更新中...

Product Q&A FAQ
產(chǎn)品問答FAQ
  • Western Blot(WB)實(shí)驗(yàn)中有很多雜帶咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多個(gè)修飾位點(diǎn),本身可以呈現(xiàn)多條帶,建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析,獲得蛋白序列的修飾位點(diǎn)信息,通過去修飾確定蛋白實(shí)際大小;

    2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時(shí)在冰上操作;

    3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;

    4、抗體特異性不強(qiáng),建議使用特異性強(qiáng)的抗體;

    5、抗體孵育時(shí)間過久,建議減少抗體孵育時(shí)間;

    6、二抗與抗原有交叉反應(yīng),建議選擇合適的封閉物;

    7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強(qiáng)度;

    8、底物顯色與曝光時(shí)間過長(zhǎng),建議縮短顯色及曝光的時(shí)間。


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