本產品主要成分為Tris-base 、甘氨酸和SDS。本產品的使用非常簡單,只需將您使用的常規TG電泳緩沖液系統更換為本產品的稀釋液,調整電壓后進行電泳即可,無需添加任何實驗步驟。同時本產品可重復使用4-5次,既可節省您寶貴的時間也可降低您的實驗成本。
a.具體使用方式按照相應實驗需要直接添加即可。
c.電泳完成后收集電泳槽內、外槽電泳液,4℃保存,可重復使用4-5次,但如發生渾濁請勿使用。
d.應用本產品所進行的SDS-PAGE的結果顯示,本產品的應用會使蛋白的分辨范圍發生變化,同等濃度的凝膠,其分辨的分子量要小于使用TG電泳緩沖液,因此在選擇凝膠濃度時請適當參照下表,可在一定程度.上有效選擇凝膠濃度進行電泳。
1.將適量的本產品加入到電泳槽的內、外槽中, 調整電源為恒壓200-250 V進行電泳。電泳指示劑溴酚藍至凝膠底部,所需時間約20- 30 min。
2.本產品中含有SDS,是為變性膠電泳設計的,對于不含SDS的天然膠電泳不適用。
3.對人體有害,操作時請務必帶手套。如濺到皮膚上,請立即用大量水沖洗。
4.本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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