脫脂奶粉一般用于Western Blot實驗中作為封閉液。使用脫脂奶粉配制成溶液作為封閉劑或抗體稀釋溶液，可以有效減少一抗或二抗和膜的非特異性結合，降低背景，增強信噪比。常用TBST作為溶劑，建議使用濃度3%-5%。本產(chǎn)品常溫保存與運輸，有效期為12個月。使用時現(xiàn)配現(xiàn)用，按需配制，溶液不可長期保存。
1.Naying S ,Zhengdan L ,Xi L , et al.Pathological observation and transcriptomic analysis of thymus injury in PRRSV-infected piglets.[J].Veterinary research communications,2023,47(4):1949-1962.(IF 2.2)
答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現(xiàn)多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大??；
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
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