伊紅(eosin)是一種化學合成的酸性染料,在水中解離成帶負電荷的陰離子,可以和蛋白質氨基上帶正電荷的陽離子結合,從而使細胞胞漿染成不同程度的紅色或粉紅色,與蘇木素染色液染色形成的藍色細胞核形成鮮明對比,從而使蘇木素伊紅(HE)染色成為病理組織切片中廣泛使用的一種常規染色方法。
1. 需要用戶自己準備的試劑
2. 樣品處理
3. 蘇木素伊紅(HE)染色
染色液可以重復使用多次,認為效果不佳時再更換新的染色液。
樣品數量很多時,可以用染色架和染色缸,便于操作。
次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預實驗。
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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