鈣在人體內(nèi)大量存在，構(gòu)成骨骼作為支持人體的支架,在分泌、運(yùn)送、肌肉收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)等也起重要作用。鈣在機(jī)體內(nèi)以兩種形式存在，一種是離子鈣,存在血液循環(huán)內(nèi)，即所謂血鈣;另-種是結(jié)合鈣，和蛋白、碳酸或磷酸結(jié)合而沉著在組織內(nèi)。除骨骼和牙齒外，正常時(shí)鈣滲透在所有組織和細(xì)胞中,一般不以固體狀態(tài)出現(xiàn)在組織內(nèi)。但在某些情況下,鈣析出成固體并沉著于組織內(nèi)，則為病理性鈣鹽沉著。沉著的鈣鹽主要是磷酸鈣，其次為碳酸鈣。鈣鹽通常是單折射的，但草酸鈣是雙折射的。當(dāng)使用HE染色時(shí)，鈣-般呈紫藍(lán)色。許多染料可以于鈣形成螯合物，包括茜素紅S、紅紫素、核固紅等。
茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物，是茜素磺酸鈉鹽，它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物。茜素紅S往往對(duì)少量的沉積物染色可得到更可靠的結(jié)果。常與固綠或Mayer蘇木素染色液合用，結(jié)合形成橘紅色沉淀,適用于少量鈣鹽組織的染色。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不用于臨床診斷或治療。
1、茜素紅染色液的染色時(shí)間要根據(jù)鈣鹽的含量來(lái)確定，應(yīng)在顯微鏡下觀察,見(jiàn)鈣鹽呈較深的橙紅色即取出水洗，如染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),就出現(xiàn)彌散現(xiàn)象, 一般5min即可。
2、經(jīng)過(guò)茜素紅染色液染色后，鈣沉積物是雙折射的。
3、復(fù)染液采用固綠時(shí) ,背景呈綠色。復(fù)染液采用Mayer蘇木素時(shí),細(xì)胞核呈藍(lán)色。
4、該方法在辨別和檢測(cè)少量鈣時(shí)特別有用如腎中的異常鈣化(尿鈣過(guò)多)。
5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一-次性手套操作。
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1、沒(méi)有對(duì)非特異性結(jié)合進(jìn)行封閉或封閉不充分；
2、一抗?jié)舛瓤赡苓^(guò)高；
3、孵育溫度可能過(guò)高；
4、二抗可能存在非特異性結(jié)合；
5、組織洗滌不充分；仍然存在固定劑；
6、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶具有活性；
7、固定步驟導(dǎo)致自發(fā)熒光（如果使用熒光檢測(cè)）；
8、組織內(nèi)自發(fā)熒光（如果使用熒光檢測(cè)）；
9、信號(hào)放大過(guò)多（間接檢測(cè)技術(shù)）；
10、底物過(guò)多（酶檢測(cè)）；
11、色原與組織樣品中存在的PBS反應(yīng)（酶檢測(cè)）。
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