Fluo-2 早是由 Roger Tsien 博士發(fā)明的鈣離子指示劑 Fluo 系列之一，目前，F(xiàn)luo-3 和Fluo-4 已成熟商品化。然而，F(xiàn)luo-2 在細(xì)胞內(nèi)比 Fluo-4 要更明亮，主要可能是由于大部分細(xì)胞對(duì) FLuo-2 的加載能力要高于 FLuo-4。
Fluo-3 成像涉及到鈣離子信號(hào)通路的多個(gè)方面，F(xiàn)luo-3 經(jīng)常應(yīng)用在流式細(xì)胞術(shù)上，如螯合劑光活化、第二信使、神經(jīng)遞質(zhì)以及細(xì)胞水平的藥理篩選。Fluo-3 在這些應(yīng)用里之所以能大量運(yùn)用主要是由于其幾個(gè)重要特性：Fluo-3 可以被氬離子激光器 488nm 激發(fā)，并在與 Ca2+結(jié)合后，發(fā)射熒光很明亮的熒光信號(hào)。
Fluo-3 AM 是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM 的熒光非常弱，其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。Fluo-3 AM 進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成 Fluo-3，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3 可以和鈣離子結(jié)合，結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，大激發(fā)波長(zhǎng)為 506nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為 526nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為 488nm 左右，發(fā)射波長(zhǎng)為 525-530nm。
更新中...
答：可能的原因包括培養(yǎng)基質(zhì)量、血清質(zhì)量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有：
1. 使用高質(zhì)量的培養(yǎng)基和血清，確保其無(wú)菌、無(wú)支原體污染，并保證在保質(zhì)期內(nèi)使用；
2. 培養(yǎng)箱溫度和氣體比例要保持穩(wěn)定，定期校準(zhǔn)；
3. 每天檢查并記錄細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境參數(shù)，如溫度、pH值、氣體比例等，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題；
4. 定期更換培養(yǎng)基，保持細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)充足；
5. 對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞株，可以嘗試進(jìn)行克隆篩選或更換培養(yǎng)基。
Copyright ?湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部備案：鄂ICP備17001029號(hào)-1 技術(shù)支持：武漢微盟
