Super Fluor 系列(可替代Alexa Fluor 系列)熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應用范圍(pH 4~10), 更好的抗淬滅性。在生物熒光領域已逐漸替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等熒光染料。
1.純化的蛋白buffer 中不得含有銨離子或伯銨,因為它們會與蛋白質競爭結合活性染料。
2.不純的抗體或者含BSA 或明膠的抗體標記效果不好。
3.低濃度的NaN3(<3mM)或thimerosal(<1mM)不影響偶聯效果。
4.其水溶液現配現用,不能儲存;
5.任何溶解后的染料好立即使用;
6.無水的DMSO溶液-20°C保存多2個星期。
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答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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