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Super Fluor 系列（可替代Alexa Fluor 系列）熒光探針，具有更強的熒光強度，更廣的pH應用范圍（pH 4～10）, 更好的抗淬滅性。在生物熒光領域已逐漸替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等熒光染料。

1)?蛋白溶解：用0.1 M NaHCO3溶解至終濃度為2mg/mL

???將1ml?去離子水加入84mgNaHCO₃瓶中，配成1M?的碳酸氫鈉溶液。振蕩或吹打至完全溶解。該溶液pH約8.3，2～6℃保存可用2星期；若抗體是溶液，將抗體稀釋至2mg/mL，再加入1/10?體積的上述碳酸氫鈉溶液；若抗體是凍干粉，將1M?碳酸氫鈉溶液用10?倍去離子水稀釋成0.1M?后，用其將抗體溶成2mg/mL的溶液；

2）染料溶解：活化Super Flour SE染料固體粉末從冰箱放入干燥器中慢慢升至常溫后，用無水DMSO將染料配置濃度為1 mg/mL。

3）標記：在1mL蛋白溶液中緩慢加入適量染料溶液，（蛋白:染料摩爾比=1:20～50；質量比可在以下范圍內優化10～200ug Super Flour SE?每毫克IgG抗體）。同時在暗處常溫緩慢攪拌1小時。也可以直接將蛋白溶液直接加入染料的固體粉末的試劑瓶中，同時在暗處常溫緩慢攪拌1小時。

4）純化：用透析法或者葡聚糖Sephadex純化產品后，產品冷凍干燥成粉末或在0.01 M PBS/2mM疊氮化鈉溶液中，-20℃避光儲存。

5）貯存：標記好的蛋白貯存于2～6℃，避光。若純化的蛋白偶聯物濃度小于1mg/mL，加入BSA?或其他穩定蛋白1～10mg/ml。在2mM?疊氮鈉存在的情況下，2～6?度可保存幾個月。保存更長時間，則需分裝后-20℃保存。避免反復凍融，避光保存。

對于IgG?等大多數抗體來說，摩爾吸光系數為203000，F/P值在4～9?之間是合適。

1）用PBS?精確倍數稀釋定量的少許純化過的偶聯蛋白，在1cm比色皿中測定280nm和555nm的光吸收；

2）計算樣品中的蛋白濃度：蛋白摩爾濃度=(A280-(A555×0.08))×稀釋倍數/203000

3）計算標記比例：每摩爾蛋白結合的染料摩爾數=A555×稀釋倍數/(150000×蛋白摩爾濃度)。

1. 其水溶液現配現用，不能儲存；

2. 任何溶解后的染料好立即使用；

3. 無水的DMSO溶液-20°C保存多2個星期。